6.2 DNA片段的扩增——PRC技术
pcr原理dna的复制需要酶、原料、能量、引物dna的变性和复性受温度影响
pcr过程
变性
复性
延伸
操作步骤
配制pcr反应体系
移入离心管
放入pcr
设置工作参数
dna扩增
测定含量
稀释
调零
测定并读数
计算
（四）实例探究例1 在（ ）的温度范围内，dna的双螺旋结构解开 a. 10－20℃ b. 80－100℃ c. 20－30℃ d. 40－60℃解析：蛋白质大多不能忍受60－80℃的高温，而dna在80℃以上才会变性。答案：b例2 关于dna的复制，下列叙述正确的是（ ）a. dna聚合酶不能从头开始合成dna，只能从5’端延伸dna链b. dna复制不需要引物c. 引物与dna母链通过碱基互补配对进行结合d. dna的合成方向总是从子链的3’端向5’端延伸解析：由于dna聚合酶不能从头开始合成dna，只能从引物的3’端即复制方向由3’端向5’端延伸；由于dna分子是反向平行的，子链是依据碱基互补配对原则，在dna聚合酶作用下合成的，其合成方向是从子链5’端向3’端延伸。答案：c☆综合应用例3 下列有关pcr描述，不正确的是（ ）a. 是一种酶促反应b. 引物决定了扩增的特异性c. 扩增产量按y＝（1＋x）nd. 扩增对象是氨基酸序列e. 扩增对象是dna序列解析：pcr是一种体外迅速扩增dna片段的技术，它以极少量的dna为模板，以四种脱氧核苷酸为原理，在引物的作用下使dna聚合酶从引物的3’端连接脱氧核苷酸，短时间内迅速复制上百万份的dna拷贝，其扩增产量为y＝（1＋x）n，y代表dna片段扩增后的拷贝数，x表示平均每次的扩增效率，n代表循环次数，因此答案选d。答案：d★课余作业1、pcr与生物体dna复制有何区别？2、如果在案件侦破过程中，只收集到一根毛发，但它所含的遗传信息太少，该怎么办呢？★教学体会教师在教学过程中，可以鲜引导学生回忆必修2的有关dna复制的知识，在此基础上，学生可加深对于pcr原理的认识。对于pcr反应过程的教学，应以读图识图为主。教材中反应过程图解详细的描绘了参与pcr的各种组成成分；每一轮反应的三个基本步骤—变性、复性、延伸；每一步骤的作用。教师在教学中可以请学生在读图的同时，结合教科书中的文字说明来加深理解。当学生遇到难以理解的地方时，教师要及时给予解答。
